Neuronal Basal Medium

神经元细胞基础培养基

♢建议储存于2-8℃冰箱中。

♢使用时注意无菌操作。

1、 产品描述

模基生物神经元细胞基础培养基，是一款专为产前 / 胚胎神经元细胞培养设计的专用基础培养基，需搭配无血清补充剂（推荐使用模基生物 O27 无血清添加剂，货号：MB-230614A010）使用。其适用范围广泛，可满足海马体、大脑皮层及大脑其他区域神经细胞的体外培养需求，为神经细胞提供稳定适配的生长环境。产品与无血清添加剂组合使用时，具备显著技术优势：无需依赖星形胶质细胞饲养层，即可实现神经细胞同源群落的长期稳定培养。产品中不含L-谷氨酰胺、L-谷氨酸和L-天冬氨酸，必须组合无血清添加剂/血清和0.5 mM L-谷氨酰胺/0.5 mM L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液。初次接种原代海马体神经元前，需在神经元基础培养基中额外添加25 µM（3.7 µg/mL）L-谷氨酸。

2、 产品信息

3、 使用说明

a)     完全培养基配制

1、   4°C冰箱中取出神经元细胞基础培养基。根据培养需求，无菌添加以下任一组合的添加剂：

1.1.      100 mL神经元细胞基础培养基补充2 mL O27无血清添加剂（50X）或其他O27添加剂变体，以及0.5 mM L-谷氨酰胺或0.5 mM L-丙胺酰-谷氨酰胺；

1.2.      100 mL神经元细胞基础培养基补充1 mL N-2添加剂（100X），并加入终浓度0.5~2 mM的L-谷氨酰胺或L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液；

2、   原代神经元细胞首次接种平板时，应先额外添加25 µM（3.7μg/ml）L-谷氨酸。部分细胞系需要加入终浓度2%的血清促进细胞贴壁；

3、   完全培养基配制完成后，可以在4°C冰箱中稳定保存1周。

4、   本品使用碳酸氢钠缓冲系统，因此需要5% CO2的环境来维持生理pH值。

b)     神经元细胞培养

1、   用无菌DPBS稀释聚-D-赖氨酸溶液，制备浓度为50 µg/mL的工作液。

2、   用50 µg/mL聚-D-赖氨酸工作液包被培养容器，原代神经元培养需按0.15 mL/cm²表面积添加工作液。室温孵育1小时。

3、   移去包被液，并用无菌水冲洗两次（包被液有细胞毒性，请冲洗彻底）

4、   移除无菌水，将包被后的培养容器在洁净工作台中开盖晾干。2小时后培养表面可完全干燥，干燥后可立即使用，或在4℃条件下干燥保存。4℃保存时需用封口膜密封容器，且需在包被后一周内使用。

5、   按照标准实验室流程或细胞附带说明书，分离原代神经元或复苏冷冻保存的原代神经元。

6、   将细胞接种到预热至37℃的完全培养基中，建议接种密度为160个细胞/mm²，或根据需求调整为优化密度。

7、   将培养皿置于36℃~38℃、含5%二氧化碳的湿润环境中培养。

8、   孵育4~24小时后，吸弃一半培养基，替换为等体积新鲜培养基，将培养板放回培养箱。

9、   每3~4天换液一次，每次吸弃一半培养基并替换为等体积新鲜培养基。

10、 注：培养神经母细胞瘤细胞时，接种及后续换液所用培养基均需含谷氨酸。

V1.0版

更新时间：2025/12/09