Human Glioblastoma Organoid Medium Kit

人脑胶质瘤类器官培养基套装

人胶质瘤是一种起源于神经胶质细胞的脑肿瘤，使用类器官技术可以帮助研究人员更好地理解肿瘤的行为，并测试潜在治疗方案的有效性。模基生物人脑胶质瘤类器官培养基套装（Human Glioblastoma Organoid Medium Kit）是一种化学定义的细胞培养基，用于建立高度仿真、操作简便、稳定的人脑胶质瘤组织来源的类器官模型可支持相关肿瘤研究与药物测试。

2、 产品信息

3、 其他自备材料和试剂

4、 人脑胶质瘤类器官培养基的制备

1、   收到人脑胶质瘤类器官基础培养基后，将培养基置于4℃冰箱进行解冻；

2、   将解冻后培养基上下颠倒充分混匀，在无菌的生物安全柜或超净工作台中将培养基进行分装，推荐分装成10mL/ 管；

3、   将分装后的培养基储存于-20℃，使用时将分装后的培养基转移至4℃冰箱解冻。

5、 原代人脑胶质瘤类器官的建立与传代培养

注意：涉及主要人体组织材料的研究必须遵循所有相关的机构和政府法规。在收集主要人体组织材料之前，必须获得所有受试者的知情同意。

a)     原代人脑胶质瘤类器官的建立

1、   在模基生物活组织保存液中收集原代人脑胶质瘤组织。

2、   将组织放入小皿中，用含有1%双抗的预冷DPBS清洗两次组织。

3、   在含有1%双抗的DPBS中使用外科剪刀或手术刀将组织坏死部分剔除，留下透明的胶质瘤组织并剪切成1mm³的小块（切勿撕扯）。

4、   去除碎片：用模基生物类器官防粘附润洗液润洗过的宽口枪头组织混悬液转移入润洗过的10mL离心管中静置，约5min后碎片沉底，吸走上清。

5、   裂解红细胞：在组织块沉淀中加入3~5mL红细胞裂解液在摇床上振荡5min，加入5mL模基生物上皮类器官基础培养基，轻轻混匀后静置5min，4℃下以250g离心3分钟，弃去上清，弃去上清。

6、   在组织块沉淀中加入人脑胶质瘤类器官基础培养基，混悬后用润洗过的宽口枪头将混悬液接种到超低粘附六孔板中，每孔15~25个胶质瘤块，接种完成后加入人脑胶质瘤类器官培养因子B。

7、   将接种完成后的培养板放入37℃、5% CO₂恒温培养箱，静置1小时，静置结束后置于水平摇床上摇晃80rpm孵育，以促进类器官的形成，便于增加营养和氧气的扩散。

8、   每隔两天换一次液。第一周会脱落很多细胞，培养基容易浑浊，此为正常现象，按时换液即可

注意：换液时可45°倾斜培养板，用润洗过的宽口枪头吸走培养基上清。

9、   肿瘤块一般在10~30天形成胶质瘤类器官。

b)      人脑胶质瘤类器官的传代培养

1、   用精细解剖剪和镊子将类器官剪为直径约0.5mm的小块进行繁殖，以避免类器官内核缺氧死亡。

2、   将剪过的组织块转移至超低粘附六孔板中，加入人脑胶质瘤类器官培养基，将接种完成后的培养板放入37℃二氧化碳恒温培养箱中，置于水平摇床上80rpm摇晃孵育。

V2.1版

更新时间：2025/10/27